Количественный и качественный пцр гепатит с

Что такое ПЦР анализ и вирусная нагрузка?

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это лабораторный метод определения ДНК и РНК. Впервые он был опробован почти полвека назад американцем Кэри Муллисом. Этот сверхчувствительный анализ способен определить носителя генома по одной исходной молекуле, содержащейся в крови, слюне или коже.

Метод ПЦР имеет огромные перспективы, находит применение не только в медицине, но и в генной инженерии, и в криминалистике. С его помощью клонируют и создают новые виды ДНК, определяют степень родства. По кусочку эпителия, найденного на месте преступления, устанавливают преступника.

Анализ ПЦР на гепатит – что это и зачем делают?

Почему необходим анализ ПЦР при подозрении на гепатит С, что это такое?

Вирус гепатита С – РНК содержащий вирус, имеет 6 генотипов и до 500 субтипов. Из всех гепатитов этот вирус обладает самой высокой мутационной способностью и преодолевает защитный барьер иммунной системы. Из общего числа заболевших гепатитами, вирус С стал причиной 70% случаев хронической формы и 30% цирроза и рака печени.

Специальный препарат, основанный, на натуральных веществах

Цена на препарат

Отзывы о лечении

Первые результаты чувствуются уже через неделю приема

Подробнее о препарате

Всего 1 раз в день, по 3 капли

Инструкция по применению

Суть способа: часть исследуемого гена с помощью специальных ферментов и условий заставляют размножаться в пробирке. Анализ ПЦР позволяет определить штамм вируса, без которого невозможно провести результативное лечение: каждый генотип по-разному чувствителен к антивирусным препаратам. Применяется два типа ПЦР:

  • качественный;
  • количественный.

Противовирусная терапия нуждается в постоянном контроле, чтобы своевременно скорректировать лечение, для этих целей также используется полимеразная цепная реакция.

Качественный и количественный ПЦР

ПЦР качественный на гепатит С дает ответ: есть ли в крови пациента штамм вируса С и какой именно. Генотипирование необходимо для уточнения диагноза, прогноза заболевания и определения сроков лечения.

По принятой классификации ген обозначается числом, а подтип маленькой латинской буквой.

Расшифровка таблицы генотипов вируса С:

  • Генотип 1а, 1b, 1с
  • Генотип 2а, 2b, 2с, 2 d
  • Генотип 3а, 3b, 3с, 3d, 3e, 3f
  • Генотип 4а, 4b, 4с, 4d, 4e, 4f, 4g, 4 h, 4 i, 4 j
  • Генотип 5 а
  • Генотип 6 а

Самые распространенные генотипы 1,2,3. В России чаще всего встречаются 1а, 1b, 2 и 3 штаммы вируса С.

Генотип вируса 1b труднее других поддается лечению, в 90% переходит в хроническую форму, из которых 30% перерождаются в рак или цирроз печени.

Генотипы 2а и 3а имеют степень хронизации 33-50 %, более отзывчивы на противовирусную терапию.

При подтверждении присутствия вируса проводится ПЦР количественный на гепатит С, с помощью которого рассчитывают количество молекул РНК, находящихся в лабораторном образце больного.

Расшифровка анализа

Качественный ПЦР анализ имеет два ответа:

ПЦР отрицательный означает, что возбудитель в образцах крови не обнаружен.
Положительный ответ свидетельствует об обратном: обнаружены РНК того или иного генотипа вируса С.

Вероятность достоверности результата равна 95%. Остальные 5% — это ошибка по вине человека. Такая возможность допускается из-за высоких требований к проведению исследования:

  • правил хранения реактивов;
  • соответствующей квалификации медперсонала;
  • чистоты биоматериала.

Сам набор ПЦР имеет 100% диагностическую точность.

Количественный ПЦР РНК гепатита С позволяет определить вирусную нагрузку на организм больного. С его помощью:

  • уточняется стадия заболевания (острая, хроническая);
  • определяется эффективность противовирусного лечения;
  • выясняется необходимость биопсии печени.

В некоторых случаях больной не ощущает никаких признаков болезни, в то время как методом ПЦР установлено инфицирование ВГС. Это означает, что заболевание находится на ранней стадии развития либо в хронической форме. Для уточнения диагноза необходимы дополнительные исследования, для скорейшего начала противовирусного лечения.

Вирусная нагрузка при гепатите С

Вирусная нагрузка показывает активность печеночного вируса, насколько активно происходит его размножение.

Что это?

ПЦР количественный гепатита С измеряется в Международных Единицах на 1 мл или МЕ/мл, что означает, сколько в 1 мл исследуемой крови обнаружено копий рибонуклеиновой кислоты определенного штамма вируса С.

Какая считается высокой, какая низкой?

Анализ на вирусную нагрузку позволяет определить наличие вирусных РНК в концентрации 50 МЕ/мл. Вирусная нагрузка в норме это когда ПЦР не обнаружено ни одной молекулы РНК ВГС.

Таблица вирусной нагрузки:

  • низкая – концентрация от 600 МЕ/мл 3*104 МЕ/мл;
  • средняя – концентрация от 3*104 МЕ/мл до 8*105МЕмл;
  • высокая – уровень более 8*105 МЕ/мл.

Низкая вирусная нагрузка – это сигнал, что терапевтическое лечение подобрано правильно, и прогноз на излечение от гепатита С – благоприятный.

Высокая концентрация вирусных клеток свидетельствует, что болезнь находится в острой фазе. Кровь пациента является опасным источником инфекции.

Вирусная нагрузка, показатели которой находятся на среднем уровне, характеризует либо хроническую стадию ГВС, либо может иметь два тренда развития: к ее повышению или понижению.

По ее окончании – через 6 месяцев делается контрольная ПЦР.

Стоимость ПЦР диагностики

Поводом для беспокойства должны стать следующие симптомы:

  • общая слабость;
  • изменение цвета кожи, глазных склер, выделений;
  • тошнота;
  • снижение аппетита;
  • боли в мышцах и суставах;
  • тяжесть в правом подреберье;
  • повышенный уровень в крови АСТ и АЛТ.
Читайте также:  Мкб 10 о инфаркт миокарда

При контакте с инфицированными больными, в предоперационный период, при гемодиализе также рекомендовано обследование.

Государственные клиники делают анализ крови на ПЦР бесплатно, если имеется направление от инфекциониста или гепатолога.

Платные услуги по ПЦР диагностике оказывают во всех крупных российских городах. Стоимость зависит от типа теста, имеющегося оборудования, сроков проведения и других факторов.

Качественный ПЦР анализ в Москве и С-Петербурге обойдется от 600 до 900 руб. В регионах – от 300 до 800 руб.

Определение вирусной нагрузки гепатита С будет стоить 17000-22000 руб. Для прочих видов инфекции цена количественного исследования: 1200-10000 руб.

Достоинства и недостатки метода ПЦР

В чем преимущества метода полимеразной цепной реакции перед другими диагностическими способами?

  1. Широкий спектр применения. С помощью ПЦР, используя типовое оборудование, можно определить любой вирус.
  2. Точность определения возбудителя. Применяя различные комбинации ферментов и технику проведения анализа, достигается 100% спецификация исследования для обозначенной инфекции.
  3. Высокая чувствительность. Методика позволяет выявить присутствие в крови одной молекулы вируса.
  4. Оперативность. Качественный анализ бывает готов через несколько часов, количественный – через двое суток.
  5. Диагностика вируса в инкубационном периоде. При ПЦР возбудитель определяется не по наличию антител, когда уже имеется иммунная реакция организма, а до начала патологического процесса, что облегчает лечение.

Недостатки ПЦР являются следствием ее достоинств:

  • для чистоты анализа требуется высочайшая степень чистоты, в том числе воздуха в лаборатории, чтобы «чужие» ДНК не попали в исследуемый образец;
  • высокие требования к персоналу, осуществляющему забор и анализ биоматериала.

Источник: zapechen.ru

Качественный и количественный анализ ПЦР на гепатит С: отрицательный, положительный, расшифровка

Гепатит С является болезнь с вирусной этиологией, которая поражает печень. Провоцирует данное состояние вирус HCV с РНК-молекулой. Наличие этой кислоты дает возможность делать анализ ПЦР на гепатит С.

Опасность рассматриваемого заболевания в том, что период между попаданием вируса в организм и появлением первых симптомов может быть довольно длительным — от 1-2 до 4-5 недель. Это мешает выявить заболевания и начать терапию своевременно.

Зависимо от особенностей организма носителя вируса заболевание может протекать остро, а также приобретать хроническую форму, которая требуется затратного и продолжительного по времени лечения. Если обнаруживаются вирусные частицы гепатита С, то пациента назначаются необходимые анализы, одним из которых есть ПЦР на гепатит С. Этот анализ проводится абсолютно всем лицам, у кого были обнаружена антитела к вирусу.

Анализ крови поможет доктору определить наличие или отсутствие вируса гепатита С в организме пациента. Данный показателя определяют количество вируса, который поразил организм, а также его генотип и характеристики.

На основе полученных результатов после проведения данного анализа, а также ссылаясь на дополнительное проведенные исследования специалист определяет продолжительность лечения, и степень угрозы пациента для здоровья других людей.

Что такое РНК-анализ на гепатит С?

ПЦР гепатит С имеет и другое название — РНК-анализ. Такое название объясняется тем, что в вирусе присутствует частичка РНК. Этот микроорганизм способен мутировать.

Все генотипы вируса характеризуются дифференциальной резистентностью, именно поэтому каждому пациенту назначаются разные методы терапии и в каждом индивидуальном случае дальнейший прогноз может отличаться.

В качестве исследуемого материала выступает кровь из вены. ЕЕ нужно сделать на голодный желудок. Обычно тестирование осуществляется методом Real-Time PCR, но также может использоваться тест COBAS AMPLICOR. В не зависимости от выбранного типа исследования крайне важно учесть порог чувствительности, то есть возможность реагента определить саму малую концентрацию вирусных частиц в крови.

Если показатели нормальные, то в расшифровке теста будет указано «не найдено».

Виды анализа на гепатит С методом ПЦР

  • количественный анализ;
  • качественный;
  • генотропирование.

Благодаря тесту можно выявить генетику вирусной инфекции, а также стадию его развития в организме пациента. В зависимости от того, насколько система диагностики чувствительна, анализ моет проводиться либо один раз либо несколько — для подтверждения результата, используя более чувствительный реагент.

Качественный ПЦР гепатита С

Рассматриваемый анализ также может называть анализ ПЦР на гепатит С качественный. Обычный уровень чувствительности теста, который позволяет определить присутствие вируса — от 10 до 500 МЕ.

При отрицательных показателях можно говорить о том, что уровень вируса в крови пациента значительно меньше порога чувствительности теста.

В случае, если результаты тестов ничего не показали, доктору необходимо немного больше узнать о пороге чувствительности пациента.

Тест может определить наличие вируса в организме пациента примерно через неделю после инфицирования.

Количественный ПЦР гепатита С

Благодаря подобному исследованию можно узнать количество РНК флавивируса присутствует в организме человека. Он определяет, сколько вирусного РНК есть на 1 кубическом см крови. Результаты анализов расшифруются в МЕ на мл.

Количественную диагностику ПРЦ следует проводить прежде чем назначать лечебную терапию, ну и конечно же после проведенных процедур, примерно на 12 недели лечения. Данная процедура необходима для того, чтобы удостоверится в правильности лечебной терапии. Вирусная нагрузка дает возможность определить 3 главных показателя болезни:

  • продолжительность и прогноз противовирусного лечения (чем большей будет вирусная нагрузка, тем длительней будет терапевтический курс);
  • эффективность, а также метод терапии;
  • инфекционность, то есть степень риска передачи вируса от зараженного человека к здоровому.
Читайте также:  Лечение начала кашля у детей

Данный вид диагностики зависит от вида лабораторного теста, а также от порога чувствительности.

Генотропирование

Так как HCV имеет высокую активность в плане мутации, при проведении теста необходимо определить, какой генотип вируса присутствует у больного в крови. Существует 11 генотипов вируса гепатита С, они также делятся на разные субтипы.

Следует помнить о том, что данный этап анализа крайне важен, потому что благодаря нему доктор может сделать выводы об фазе вируса, назначить подходящее лечение, а также выписать пациенту наиболее эффективные препараты.

Различные генотипы HCV поддаются лечению по-разному. К примеру, чтобы вылечить первый генотип потребуется более года, а эффективность такой терапии примерно 65%. А вот генотип 2 и 3 можно вылечить за полгода, при этом эффективность терапии значительно выше — примерно 90%.

Также следует отметить, что благодаря генотипироанию можно также понять, в каком состоянии находится печень. К примеру, часто генотип 3 протекает совместно с стеатозом, который способствует накоплению жира в клетках печени.

Анализ крови на ПРЦ способен определить генотип заболевания. В некоторых случаях тестовые системы не могут определить вирус. В таком случае можно получить результат «не типируется». Подобный результат анализов говорит о том, что генотип вируса не характерен для определенной территории. В подобных случаях нужно провести повторные анализы но уже с высшим пороком чувствительности.

Расшифровка анализа ПЦР на гепатит С

Вся расшифровка анализов основана на сведениях полученных ранее. Благодаря лабораторным исследованиям в большинстве случаев обозначаются такие данные:

  • тест обычно называется Real-time;
  • обозначается цифра генотипа;
  • к-во фракций с РНК;
  • найдено или не найдено.

Самым важным при расшифровке данного анализа есть пункт под номером 3. Он позволяет увидеть вирусную нагрузку, от которой зависит продолжительность лечебных процедур, и дальней шее состояния пациента, а также его время его выздоровления.

Результаты исследований показывают цифру генотипа а также иногда можно увидеть латинскую букву, которая является определителем субгенотипа вируса. Чтобы доктор мог поставить правильный диагноз и назначить лечение ему необходимо знать генотип заболевания, этого будет достаточно для проведения дальнейших действий.

Если ПЦР анализ на гепатит С отрицательный, а ИФА положительный — что это значит?

Для того, чтобы расшифровать анализы, надобно обратиться к таким специалистам — инфекционисту либо гепатологу. Эти доктора смогут расшифровать полученные данные. В основном расшифровка результатов анализа крови, да и вообще любых анализов, для человека без медицинского образования, совершенно непонятны.

К примеру, при отрицательном тесте на гепатит, и ИФА положительном, смело можно утверждать об отсутствии у пациента НСВ, но это не исключает того, что гепатит С пациент перенес намного раньше, при чем в острой форме.

Считается, что положительный ИФА говорит, о том, что в кровяном русле обнаружены антитела, произведенные после того, как вирус был в прошлом поражен. Однако в нынешней медицине этот анализ не считают достаточно надежным. Доктора его используют исключительно в качестве первичного скрининга. При диагностике болезни доктора отталкиваются от показателей ПЦР-тестов.

Выводы

Чтобы сделать анализ ПЦР используется кровь из вены. Обычно делают двойной забор биоматериала — для теста ПЦР и для ИФА. Чтобы результаты были точными и достоверными, нужно соблюдать некоторые правила забора биоматериала:

  • между употреблением еды и забором биоматериала должен быть выдержан временной промежуток — не меньше 8 часов;
  • кровь нужно сдавать на голодный желудок, в первой половине дня;
  • на протяжении суток перед анализом нужно отказаться от интенсивных физнагрузок;
  • перед тем, как сдавать анализ, надобно отказаться от употребления жареной еды и от питья спиртного.

Готовые результаты можно забрать на следующий день.

Источник: nebolet.com

Как расшифровывается анализ ПЦР на гепатит С и где его можно сдать?

Медики недаром называют гепатит С «ласковым убийцей», поскольку характерные симптомы этого заболевания проявляются очень поздно, когда патологический процесс зашёл уже очень далеко. Но жизнь пациента можно значительно продлить, если вовремя выявить вирус с помощью метода диагностики – ПЦР анализ на гепатит С.

Это самый надёжный и точный метод обнаружения вирусной инфекции. ПЦР анализ на гепатит С (полимеразная цепная реакция)позволяет с высокой точностью определить конкретный тип вируса, тем самым подтвердив или опровергнув диагноз вирусного гепатита.

Существует два варианта ПЦР – анализ количественный и качественный. Количественное определение вирусов предполагает отдельную методику, отличающуюся от качественного определения вирусов тем, что в этом случае исследование ПЦР строится на искусственном увеличении количества вирусов в исследуемом материале.

Что это такое ПЦР анализ на гепатит С?

Для выполнения анализа на гепатит методом ПЦР необходим исследуемый материал, в случае вирусного гепатита – кровь пациента, которую подвергают определённым воздействиям.

Суть этих воздействий в том, что в кровь добавляют специальным образом помеченный генетический материал и ферменты. Если искомый вирус присутствует в материале, то ферменты вступают в реакцию, и количество вирусной РНК постепенно нарастает. Методика подготовки исследуемой крови к анализу позволяет значительно ускорить этот процесс.

Читайте также:  Вероятность заражения гепатитом от жены

Результаты анализа определяются с помощью химической реакции, которая позволяет визуально отобразить появление в материале большого количества вирусной РНК. Если же искомой РНК в крови нет, то будет отрицательный результат анализа ПЦР – гепатит С не обнаружен. В этом случае никаких изменений на финальном этапе не произойдёт.

Количественный анализ предполагает отдельную методику исследования, позволяющую выявить вирусную нагрузку. Следует сразу сказать, что количество вирусов в определённом объёме крови не влияет на тяжесть заболевания, но влияет на вероятность заражения вирусом других людей.

Поэтому так важно соблюдать меры профилактики, чтобы исключить заражение вирусом и предотвратить развитие гепатита и тяжелых последствий для здоровья. Медики рекомендуют периодически проверять кровь на вирусы гепатита (1 раз в год), чтобы своевременно распознать инфекцию и начать лечение.

Лаборатории, проводящие анализ ПЦР на вирус гепатита С и другие вирусные заболевания есть во всех крупных городах, поэтому доступность анализа не является проблемой. Сегодня ПЦР анализ на гепатит С можно в короткие сроки сделать не только в поликлинике, но и в лаборатории, оказывающей подобные услуги населению на коммерческой основе. Причем в этом случае, обойдется без потери времени в длинных очередях, да и результат можно получить гораздо быстрее.

Как он сдаётся?

Чтобы провести анализ необходимо сдать кровь из вены. От пациента требуется уведомить врача о сопутствующих заболеваниях – это может повлиять на время назначения анализа. Женщинам необходимо назначить сдачу анализа так, чтобы она не выпадала на месячные. Подготовка к обследованию может занять определенное время и состоять из следующих этапов:

  • Анализ на ПЦР можно назначать только через две недели после окончания курса лечения антибиотиками или противовирусными препаратами.
  • За 3-4 дня до анализа необходимо отказаться от физиопроцедур и диагностических манипуляций. Если необходим курс лечения, то анализ крови ПЦР на гепатит С проводится после его окончания. Также необходимо на это время отказаться от курения и продуктов, содержащих каротин (жёлтые овощи и фрукты).
  • За сутки до анализа следует ограничить физическую нагрузку до необходимого минимума, отказаться от жирной, острой, солёной и копчёной пищи, алкоголя, крепкого кофе.
  • Последний приём пищи перед сдачей анализа допустим не более чем за 8-9 часов до процедуры, кровь сдают натощак. Именно поэтому забор крови обычно назначают утром до завтрака.

Правильная подготовка к анализу необходима для того, чтобы его результаты получились достоверными, при нарушении этих правил возможны диагностические ошибки.

Расшифровка

Для точной диагностики очень важно правильно интерпретировать результат. Знать, как расшифровывается анализ, важно не только врачу, но и пациенту. Это поможет правильно подготовиться к анализу, избежать диагностических ошибок, сделает лечение более понятным для пациента.

Если речь идёт о качественном анализе ПЦР на гепатит С, то здесь всё просто.

  • В норме вирусы в крови не обнаруживаются, и результат отрицательный.
  • Положительный результат означает наличие вируса, и, следовательно, подтверждает заболевание гепатитом.
  • Ложноположительный результат возможен при нарушении методики забора и хранения крови, ложноотрицательный – на ранних стадиях заболевания, когда количество вирусных тел ниже, чем позволяет определить чувствительность метода.

В сомнительных случаях ПЦР могут назначить повторно через 2-3 недели.

Количественный ПЦР анализ на гепатит С определяет не только наличие или отсутствие вируса, но и вирусную нагрузку. Диапазон результатов здесь гораздо шире. Значение «ниже уровня диагностических измерений» означает, что вирус отсутствует или присутствует в очень малых количествах. Такой результат в сочетании с отрицательным показателем качественного анализа считается нормой.

Шкала перевода количества вирусных тел в международные единицы может отличаться в разных лабораториях. Поэтому лучше всего поинтересоваться, где сдать анализ ПЦР на гепатит С у своего лечащего врача. Если врач знает, какой именно шкалой пользуется лаборатория, это значительно облегчит ему интерпретацию результатов и назначение лечения.

На достоверность результатов во многом влияет степень повреждения печени непосредственно перед анализом, уровень сахара в крови на момент сдачи анализа, соблюдение медицинским персоналом правил забора и хранения крови.

Количественный тест необходим в первую очередь для оценки эффективности лечения, а качественный – для определения самого факта наличия болезни. Чувствительность качественного теста выше, поэтому его нужно делать для подтверждения отрицательного результата количественного теста.

Расшифровка анализа ПЦР на гепатит С достаточно проста – при эффективном лечении вирусная нагрузка постепенно снижается. Её повышение говорит о неэффективности лечения, несоблюдении режима или очень высокой активности вируса.

Если вирусная нагрузка оказалась ниже диагностического диапазона, то качественный анализ подтвердит или опровергнет отсутствие вируса в крови. В настоящее время вирусный гепатит С успешно лечиться с помощью индийских препаратов Софосбувир и Ледипасвир.

Средние цены

Цена на анализ ПЦР может очень сильно варьироваться в зависимости от используемой диагностической системы, уровня подготовки персонала, престижности лаборатории, места проживания пациента и прочих факторов.

В среднем цена качественного анализа начинается от 500р, количественного – от 2000. Учитывая, что делать количественный анализ необходимо раз в несколько месяцев, только на определение эффективности лечения может уйти достаточно большая сумма.

Источник: pechenzdrav.ru